Page 13 - Programa Educacional Congres SEHH-SETH 2017

• Test de criohe- mólisis: se basa en que los esferocitos presentan una he- mólisis incrementa- da cuando se incu- ban en soluciones hipertónicas al pa- sar de 37 a 0°C.
Todas estas prue- bas indirectas no son especí cas de la esferocitosis here- ditaria, ya que tam- bién pueden ser po- sitivas en otros tipos de anemias (auto- inmunes, diseritro- poyéticas...) y son pruebas de sensibili- dad variable, lo que implica un porcen- taje signi cativo de falsos negativos.
3. Citometría de
ujo. Test EMA (eo-
sin 5’maleimide):
EMA se liga de for-
ma covalente a un
residuo de lisina de
banda 3 y también
con grupos SH2 del
complejo Rh. Este
test presenta una
alta sensibilidad
(92%) y especi ci-
dad (99%) para el
diagnóstico de es-
ferocitosis heredita-
ria, independiente
de que el defecto
esté localizado en
banda 3, espec-
trina o banda 4.2,
aunque es menos sensible en alteraciones de anquiri- na. El test EMA es también muy positivo (↓↓ uorescen- cia de membrana) en piropoiquilocitosis hereditaria.
El test de EMA es positivo (patológico) si la disminu- ción de uorescencia es > 21% respecto a controles
Anemia hemolítica predominio extravascular Morfología eritrocitaria alterada
Sospecha membranopatía
Valorar: forma del hematíe, VCM, CHCM, histogramas autoanalizador Antecedentes familiares/Herencia, raza
Descartar ADC
Esferocitosis
Esferocitos VCM normal
CHCM ± ↑ Test EMA +
*Frag. osmot.
ANK, SLC4A1, SPTB, EPB42 SPTA1
Piropoiquilocitosis
Microesferocitos /Esquistocitos
VCM ↓↓↓ Test EMA ++
Estomatocitosis hiperhidratada
Estomatocitos > 40%
VCM ↑↑↑ CHCM ↓↓
Frag. osmót. ↓
Estudio permeabilidad alterado
Eliptocitosis
Eliptocitos
VCM normal CHCM normal
Ovalocitosis SA
Ovalocitos VCM normal
Xerocitosis
Xerocitos Estomatocitos <10%
VCM ↑ CHCM ↑
↑
Frag. osmót. ↑↑
SPTA1 SPTB EPB41s
Curvas de ectacitometría con per les especí cos Diagnóstico molecular Sanger/NGS
SPTA1 SLC4A1
Piezo1 KCNN4
RH AG
Figura 2. Diagnóstico diferencial de las anemias congénitas por membranopatías. * En esferocitosis un ↑ de lisis en el test de criohemólisis o una ↓ del tiempo de lisis en el test del glicerol acidi cado o en el pink test tienen similar valor diagnóstico que el ↑ de fragilidad osmótica. ** Los xerocitos son más estables a altas tem- peraturas.VivesCorronsJL.BrJHematol.1995.
normales y se considera normal hasta una disminu- ción del 16%, el rango entre 16 y 21% es controvertido; el cut-off debe ser establecido en cada laboratorio.
Respecto al diagnóstico de esferocitosis hereditaria, cuando existen esferocitos en el frotis y antecedentes
LIX Congreso Nacional SEHH-XXXIII Congreso Nacional SETH / Programa Educacional
13